Wykrywanie patologicznego białka prionowego w nabłonku węchowym w sporadycznej chorobie Creutzfeldta-Jakoba ad 5

W próbkach tkankowych od Pacjenta 4, PrP jest obecny w nabłonku węchowym (Panel C, x 412), kłębuszkach węchowych (Panel D, × 262), węchach węchowych (Panel E, × 120) i węchowym regionie węchowym (Panel F, x 100). Zastosowano mikroskopię świetlną w celu potwierdzenia tożsamości błony węchowej i oddechowej na podstawie kryteriów histologicznych.24 W wybranych próbkach badanych metodą ślepą zastosowano ekspresję .-synukleiny w celu potwierdzenia nabłonka węchowego i nabłonka oddechowego. zostały właściwie zidentyfikowane. Białko to jest obfite w cytoplazmie i dendrytach neuronów receptora węchowego i nieobecne w rzęskach kolumnowych nabłonkowych komórek nabłonka oddechowego. Barwienie hematoksyliną i eozyną w odcinkach błony węchowej u pacjentów ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba nie wykazało istotnych zmian patologicznych w porównaniu z odpowiednimi tkankami kontrolnymi zi bez innych zaburzeń neurodegeneracyjnych. Immunobarwienie dla PrP było negatywne w nabłonku węchowym wszystkich próbek pośmiertnych i biopsyjnych z grupy kontrolnej (Figura 2A). W przeciwieństwie do tego analiza immunohistochemiczna wykazała wyraźne odkładanie PrP w rzęsek neuronów receptora węchowego i słabą immunoreaktywność PrP w podstawowych komórkach nabłonka węchowego od wszystkich pacjentów ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba (Figura 2B i Figura 2C). Odwrotnie, nabłonek oddechowy nie barwił PrP (dane nie pokazane). W mózgach pacjentów ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba stwierdzono selektywne odkładanie PrP w kłębuszkach węchowych (fig. 2D), przewodach węchowych (figura 2E) i pierwotnych kortach węchowych (figura 2F).
Ekspresja PrPC w błonie śluzowej węchowej i oddechowej
Figura 3. Figura 3. Ekspresja komórkowego białka prionowego w błonie śluzowej węchowej i oddechowej od osób kontrolnych. Western blot z monoklonalnym przeciwciałem 3F4 pokazuje poziom ekspresji komórkowego białka prionowego (PrPC) w 5,3 .g homogenatu mózgu (linia 1), 21 .g błony węchowej (ścieżka 2) i 16 .g błony śluzowej układu oddechowego (linia 3) . Mózg PrPC wykrywa się jako dwa główne prążki odpowiadające diglkozylowanym i monoglikozylowanym izoformom; węchowe PrPC i oddechowe PrPC są wykrywane jako wysoce glikozylowane formy, które migrują nieco szybciej niż PrPC w mózgu.
Analiza Western blot próbek błony węchowej i oddechowej z kontroli wykazała, że obie tkanki konstytucyjnie ulegały ekspresji w PrPC. PrPC wykryto głównie w silnie glikozylowanej formie i miało nieco szybszą migrację niż ta pochodząca z mózgu (Figura 3). Poziomy ekspresji PrPC w błonie śluzowej węchowej i oddechowej wynosiły odpowiednio około 20 procent i 13 procent w mózgu.
Wykrywanie PrPSc w błonie śluzowej węchowej
Figura 4. Figura 4. Analiza Western Blot (panele A i B) błony śluzowej układu oddechowego i węchowego od pacjentów ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba pod kątem obecności nieprawidłowego białka prionowego (PrPSc) po inkubacji z proteinazą K (PK). W panelu A, ścieżki i 4 przedstawiają nieleczone homogenaty błony śluzowej układu oddechowego (15 .g) i błony węchowej (47 .g), odpowiednio, od Pacjenta 2
[podobne: usuwanie laserowe owłosienia cena, usg wroclaw, dyżury aptek gubin ]
[podobne: baclofen polpharma, dyżury aptek gubin, forskolin apteka ]