Krążące komórki progenitorowe śródbłonka, funkcja naczyniowa i ryzyko sercowo-naczyniowe cd

Pożywkę hodowlaną zmieniano co trzy dni, a liczbę kolonii liczono siedem dni po wysianiu. Kolonia śródbłonkowych komórek progenitorowych składała się z wielu cienkich, płaskich komórek emanujących z centralnej grupy zaokrąglonych komórek. Sama centralna klastra bez powiązanych wschodzących komórek nie była liczona jako kolonia. Kolonie liczono ręcznie w co najmniej czterech odwiertach przez obserwatorów, którzy nie byli świadomi profili klinicznych pacjentów. Potwierdzenie linii komórek śródbłonka przeprowadzono w próbkach od 10 osobników, jak opisano wcześniej.1,24 W skrócie, pośrednie immunobarwienie przeprowadzono z użyciem specyficznych dla śródbłonka przeciwciał skierowanych przeciwko receptorowi 2 naczyniowego czynnika wzrostu śródbłonka i CD31 lub 1,1. lipoksylowane lipidy o niskiej gęstości diacetadecylo-3,3,3 , 3 -tetrametyloindokarbocyjanian-acetylowane i kosztowne lektyny BS-1.
Aby ocenić powtarzalność, dwa razy oznaczono liczbę kolonii w dwóch oddzielnych próbkach krwi, uzyskanych co najmniej przez tydzień od 10 osobników. Próbki analizowano niezależnie przez dwóch obserwatorów, którzy nie byli świadomi profili klinicznych pacjentów. Korelacja między obserwacjami wyniosła 0,92, podczas gdy korelacja wewnątrzpassowa, uzyskana przez pojedynczego obserwatora, który analizował dwie próbki krwi uzyskane co najmniej przez tydzień od pojedynczego osobnika, wynosiła 0,97.
W celu pomiaru starzenia komórkowego rekrutowaliśmy na podstawie oceny Framingham podgrupę 16 dopasowanych pod względem wieku osób z pierwotnych 45 osób. Podgrupę podzielono następnie na grupę wysokiego ryzyka i grupę niskiego ryzyka, z ośmioma w każdej grupie (średnie wyniki, odpowiednio 7,3 . 2,3 i 1,5 . 2,1; P <0,001). Hodowle śródbłonkowych komórek progenitorowych od tych osobników utrzymywano przez siedem dni, a pożywkę zmieniano co trzy dni. Aktywność .-galaktozydazy związana z odstresiem była mierzona jak opisano wcześniej25. Analizowano izolowane komórki odległe od kolonii centralnych i policzono tylko komórki o wyraźnie niebieskiej cytoplazmie, wskazujące na aktywność .-galaktozydazy. Procent komórek dodatnich określono przez zliczenie czterech losowych pól, które zawierały w sumie około 100 do 200 komórek.
Ocena funkcji niezależnej od śródbłonka i niezależnej od śródbłonka
Reaktywność raków oceniano rano po nocnym poście. Obrazowanie tętnicy ramiennej proksymalnej do dołu łokciowego wykonano za pomocą ultrasonografii o wysokiej rozdzielczości (przetwornik z tablicą liniową 12,5-MHz, model ATL HDI 5000, Advanced Technology Laboratories), jak opisano wcześniej.26,27 Przepływ zależny od śródbłonka -dodatkowe rozszerzenie naczyń (zależna od przepływu reakcja ramienna) zostało ocenione przez pomiar maksymalnego wzrostu średnicy tętnicy ramiennej podczas reaktywnego przekrwienia wywołanego przez zwolnienie mankietu napompowanego do 225 mm Hg przez pięć minut na ramieniu, w pobliżu strona pomiarowa. Po 15-minutowym okresie spoczynku powtórzono pomiary linii podstawowej (średnica i prędkość przepływu) i podjęto podjęzykowo 0,4 mg rozpylacza nitrogliceryny w celu oceny niezależnego od śródbłonka rozszerzenia naczyń.
Zanim uczestnicy zostali włączeni do tego badania, przeprowadziliśmy ośmiotygodniowe badanie odtwarzalności całej procedury pośredniczonej przez rytonawię reaktywności wywołanej przepływem nitrogliceryny przy użyciu jednego obserwatora i siedmiu pacjentów.
[przypisy: olej śliwkowy, emg badanie cena, prosure ]
[podobne: baclofen polpharma, dyżury aptek gubin, forskolin apteka ]