Dwóch pacjentów z torbielowatą torbielą, mutacjami nonsensownymi w każdym gliwozie torbielowatym i łagodną chorobą płuc

Zwłóknienie CYSTIC jest najczęstszym zabójczym dziedzicznym zaburzeniem w białej populacji. Przejawia się to w postaci lepkich wydzielin w płucach i trzustce oraz nieprawidłowego składu elektrolitowego potu.1 Komórki nabłonkowe od pacjentów z mukowiscydozą mają nieprawidłowe przewodnictwo jonów chlorkowych przez błony szczytowe z powodu wadliwej regulacji określonego kanału chloru.2 3 4 Niewystarczające wydzielanie Chlorek uważa się za powodujący niewystarczające nawodnienie śluzu w drogach oddechowych i trzustkowych.1 Ostatnio zidentyfikowano gen mukowiscydozy i przewiduje się kodowanie białka o długości 1480 aminokwasów, nazywanego transbłonowym konduktorem mukowiscydozy (CFTR ) .5, 6 Wydedukowana sekwencja aminokwasowa CFTR sugeruje, że to białko ma kilka funkcjonalnie ważnych regionów, w tym dwie domeny wiążące ATP, dwa obszary, które oddziałują z błonami komórkowymi, oraz wysoce naładowana domena z kilkoma potencjalnymi miejscami fosforylacji przez białko. kinazy. Struktura CFTR jest podobna do białek oporności wielolekowej i kilku innych białek wiążących ATP wiążących się z błoną. Wiadomo, że te ostatnie białka przenoszą małe cząsteczki (leki, węglowodany i aminokwasy) przez błony komórkowe w procesie, który pojawia się do połączenia z hydrolizą ATP. 7, 8 Strukturalne podobieństwa między CFTR a tą rodziną białek zwiększają prawdopodobieństwo, że CFTR może uczestniczyć w regulacji wydzielniczych kanałów chlorkowych. 6, 9 Identyfikacja naturalnie występujących szkodliwych mutacji genów dostarczyła wgląd w funkcjonalnie ważne regiony kilku białek.10, 11 Najpowszechniejsza mutacja genu mukowiscydozy, AF508, prowadzi do pominięcia reszty fenyloalaniny w domniemanym pierwszym wiązaniu ATP domena CFTR, wskazując, że region ten ma kluczowe znaczenie dla funkcji.6 7 8 9 10 11 12
W pierwszej i drugiej domenie wiążącej ATP odkryto wiele mutacji bezsensownych i bezsensownych, potwierdzając znaczenie tych regionów.13, 14 W niniejszym raporcie opisujemy dwóch niespokrewnionych amerykańskich czarnych pacjentów z mutacjami nonsensownymi w każdym z chromosomów mukowiscydozy. Mutacje bezsensowne często powodują ciężką chorobę, ponieważ przedwczesne zakończenie translacji powoduje powstanie skróconych białek, które są zwykle niestabilne. Każdy pacjent miał ciężką postać trzustki, ale łagodną chorobę płuc. Ta rozbieżność jest niezwykłym odkryciem i wskazuje, że skrócenie lub nawet brak CFTR nie jest śmiertelna i może mieć większy wpływ na czynność trzustki niż na czynność płuc.
Metody
Pacjenci
Siedemnastu amerykańskich czarnych pacjentów i 25 amerykańskich białych pacjentów z mukowiscydozą, odpowiednio 23 i 29 nieznanych mutacji mukowiscydozy, było dostępnych do badań. Wszyscy pacjenci mieli dwa dodatnie testy chlorków potu (> 60 mmol na litr) i cechy kliniczne zgodne z diagnozą mukowiscydozy. Egzaminy 10, 11, 20 i 21 badano u tych pacjentów w ramach systematycznego poszukiwania mutacji w proponowanych funkcjonalnie ważnych regionach CFTR.
Sekwencjonowanie nukleotydów w eksonach glikozylacji mięśnia sercowego
Egzoty 20 i 21 w drugiej przypuszczalnej domenie wiążącej ATP amplifikowano z genomowego DNA każdego pacjenta z reakcją łańcuchową polimerazy (PCR) .15 Startery do PCR wybrano z flankującej sekwencji intronu każdego eksonu, jak następuje: 5 (5 GGTCAGGATTGAAAGTGTGCA3 ) i 20i-3 (5 CTATGAGAAAACTGCACTGGA3 ) dla eksonu 20 i 21i-5 (5 AATGTTCACAAGGACTCCA3 ) i 21i-3 (5 CAAAGTACCTGTTGCTCCA3 ) dla eksonu 21
[więcej w: dzienniczek pomiaru ciśnienia tętniczego, dyżury aptek gubin, olx łęczna ]